bulletin

2/ Fiche technique sur les dermatophytes

Milieux pour l'étude des dermatophytes

      L'identification des dermatophytes pose souvent de sérieux problèmes lorsque les souches ne présentent pas de caractères suffisamment discriminants. Il est possible, à l'aide de différents milieux d'améliorer le diagnostic mycologique, sans recourir, dans un premier temps, en routine aux techniques de biologie moléculaire
      On trouve ci-dessous une liste de milieux sur lesquels les caractères tels que la couleurs de la colonie sont différents. On peut de cette façon notamment différencier T.rubrum de T.mentagrophytes, lorsque la pigmentation ou la forme de conidies n'est pas utilisable.
      L'image montre des macroconidies typiques de T.rubrum, comme on aimerait en voir plus souvent (souche photographiée dans l' unité de mycologie de l' Institut Pasteur) vers 1960

MILIEU A L'EXTRAIT DE MALT

Extrait de Malt...................................................... . 15 g

Gélose................................................................... 15 g

Eau distillée...................................................... 1000 ml

pH: 7 Pour les champignons filamenteux

MILIEU DE TAKASHIO (Sabouraud dilué)

Glucose.................................................................... 2g

Neopeptone............................................................ 1 g

MgSO₄....,............................................................... 1 g

KH₂PO₄_._._................................................................ 1 g

Agar....................................................................... 20g

Eau distillée...................................................... 1000ml

pH : 6,2

MILIEU A L'UREE (de CHRISTENSEN)

Peptone trypsique.................................................. 1 g
NaCl.......................................................................... 5 g

KH₂PO₄_._._................................................................ 2g

Agar....................................................................... 20g

Eau distillée qsp............................................. 1000ml

Faire dissoudre -
ajouter
l gr de glucose,
3 ml de solution de rouge de phénol* à 0.4 %.

Ajuster le pH à 6.8 - 7.

Autoclaver 15 mn à 120°

Ajouter la solution d'urée à 20 % filtrée sur Miliipore (0,45 µm).
Permet de différencier
T. rubrurn [uréase - ] sauf T. rubrum « exotique » de T. ntentagrophytes [Uréase +]
La leture doit se faire au 7ème jour

MILIEU AU BROMOCRESOL POURPRE (B.C.P)

1) Eau distillée................................................. 1000ml .

Lait écrémé en poudre....................................... 80 g
Solution alcoolique à 1,6 % de BCP ............ .... 2 ml

2) Eau distillée................................................. 1000ml

Glucose................................................................. 40g

Gélose................................................................... 30 g
Stériliser 1 et 2 séparément.
Mélanger et répartir en tubes stériles après autoclavage.
pH ; 6,8. milieu de teinte bleu clair

Milieu pour différencier T. rubrum, T. mentagrophytes et M. persicolor.

Résultats :

T. rubrum ne fait pas virer le milieu , croissance +/- réduite

T. mentagrophytes ou T. mentagrophytes interdigitale le milieu vire au bleu violacé et croissance importante
M. persicolor ne fait pas virer le milieu et croissance importante

T. verrucosum hydrolyse la caséine mais ne fait pas virer le milieu.

Kane J., Smitka C. Early detection and identification af T. verrucosum. J. Clin. Microbiol. 1978: 8; 740-747.

MILIEU PEPTONE à 3 % (Sabouraud conservation)

Peptone ........................................................30 g

Gélose...........................................................20g
Eau distillée qsp ......................................1000 ml

C e milieu permet de différencier Trichophyton .mentagrophytes de Microsporum persicolor.qui prend une couleur rosée.

MILIEU PDA

Potato Dextrose Agar (Difco)..................... 39 g
Eau distillée qsp .....................................,1000 ml

pH : 5,6

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Dr Nelly Contet Audonneau

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